一、概述及分類
腸桿菌科是由多個(gè)菌屬組成，生物學(xué)性狀相似，均為革蘭氏陰性桿菌，這些細(xì)菌常寄居在人和動(dòng)物的消化道，并隨糞便排出體外，廣泛分布在水和土壤中，大多數(shù)腸道桿菌屬于正常菌群。當(dāng)機(jī)體**力降低或侵入腸道外組織時(shí)，成為條件致病菌而引起**。部分腸道桿菌是致病菌。例如：產(chǎn)毒大腸埃希氏菌、傷寒沙門氏菌、各種志賀氏菌可使人患腸道傳染病。
腸桿菌科細(xì)菌種類繁多，主要根據(jù)細(xì)菌的形態(tài)，生化反應(yīng)，抗原性質(zhì)以及核酸相關(guān)性進(jìn)行分類。腸桿菌科的細(xì)菌分為20個(gè)屬。
1、 什么是大腸菌群？
大腸菌群名稱并非細(xì)菌分類命名，而是衛(wèi)生細(xì)菌領(lǐng)域的用語，它不代表某一個(gè)或某一屬細(xì)菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌，這些細(xì)菌在生化反應(yīng)及血清學(xué)方面并非完全一致。
大腸菌群：需氧及兼性厭氧，在37℃能分解乳糖，產(chǎn)酸，產(chǎn)氣的革蘭氏染色陰性無芽胞桿菌。一般認(rèn)為該菌群細(xì)菌可包括：大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。目前已被國內(nèi)外廣泛應(yīng)用于評價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。
2、 什么是大腸桿菌？
埃希氏菌屬的代表菌種是大腸埃希氏菌。大腸埃希氏菌俗稱大腸桿菌，它是人類和動(dòng)物腸道正常菌群的成員，隨糞便排到自然界，并污染食品，本菌是組成水、食品中大腸菌群成員之一，其數(shù)目多少代表糞便污染和程度。
能引起腸道感染的大腸埃希氏菌有下列五個(gè)病原群
(1)腸產(chǎn)毒性大腸埃希氏菌(ETEC)產(chǎn)生ST、LT、引起嬰兒、旅游者腹瀉。
(2)腸致病性大腸埃希氏菌(EPEC)寄居十二指腸、回腸、空腸。引起嬰兒腹瀉。
(3)腸侵襲性大腸埃希氏菌(EIEC)有侵襲力，痢疾樣癥狀。
(4)腸出血性大腸埃希氏菌(EHEC)引起出血性結(jié)腸炎，主要菌型O157。
(5)腸粘附性大腸埃希氏菌(EAEC)損害腸細(xì)胞外**，引起小兒頑固性腹瀉。
3、 什么是大腸桿菌O157：H7？
EHEC O157:H7屬于腸桿菌科埃希氏菌屬。它是腸出血性大腸桿菌(EHEC)的主要血清型。
二、流行病學(xué)：
(一) 流行概況：
E.coli O157:H7引起的出血性結(jié)腸炎是1982年在美國俄勒崗州和密執(zhí)安州，因食用漢堡包引起的食物中毒的病人糞便中被分離并命名的。據(jù)美國**控制中心(CDC)報(bào)告，每年國內(nèi)約發(fā)現(xiàn)2萬多例病人。死亡人數(shù)200-500人，以后陸續(xù)在全球五大州20多個(gè)國家被發(fā)現(xiàn)或引起暴發(fā)和流行。自82年發(fā)現(xiàn)至今，發(fā)生規(guī)模*大的一次爆發(fā)是97年5 月下旬，日本岡山、廣島等縣幾十所中學(xué)和幼兒園相繼發(fā)生6起集體食物中毒事件，人數(shù)多達(dá)1600人，導(dǎo)致3名兒童死亡，住院兒童達(dá)80人。同時(shí)日本仙臺和鹿兒島形成中毒人數(shù)過萬人，死亡11人，波及44個(gè)都府縣的爆發(fā)性食物中毒，引起全世界的關(guān)注。此外美國、加拿大、瑞典、澳大利亞、蘇格蘭、威爾士等國家和地區(qū)也相繼報(bào)道了EHEC的散發(fā)性感染和暴發(fā)流行。
我國1988年**分離到E.coli O157:H7。從已有的流行病學(xué)調(diào)查資料看，我國也存在散發(fā)病例，還沒有爆發(fā)流行的報(bào)道。近幾年也通過監(jiān)測，先后從牛、豬、羊、糞便，肉類等食品中查到E.coli O157:H7。
(二)、流行特點(diǎn)：
1.季節(jié)性：多發(fā)生于夏秋兩季6-9月為發(fā)病高峰。11月至次年2 月極少發(fā)病。
2.地區(qū)分布：多發(fā)生于發(fā)達(dá)國家，主要以散發(fā)性為主。
3.易感人群：兒童5-9歲、老人50-59歲明顯高于其它年齡組，*小3個(gè)月，*大85歲。
4.宿主：農(nóng)場動(dòng)物牛、羊、豬、雞、馬、鹿、鴿子、海鷗等均可能為大腸桿菌
O157的攜帶者。
5.食源性E.coli O157:H7感染：牛肉、生奶、雞肉及其制品，蔬菜、水果及制品等均可引起污染，其中牛肉是*主要的傳播載體。
三、生物學(xué)特征
1.形態(tài)與染色：革蘭氏染色陰性，無芽胞，有鞭毛。
2.培養(yǎng)特性：*適生長溫度為33-42℃，37℃繁殖迅速，44-45℃生長**，45.5℃停止生長。
3.抵抗力：具有較強(qiáng)的耐酸性，pH2.5-3.0，37℃可耐受5小時(shí)；耐低溫，能在冰箱內(nèi)長期生存；在自然界的水中可存活數(shù)周至數(shù)月；不耐熱，75℃1分鐘即被滅活；對氯敏感，被1mg/L的余氯濃度殺滅。
4.生化反應(yīng)：除不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵山梨醇外，其他常見的生化特征與大腸埃希氏菌基本相似，但也有某些生化反應(yīng)不完全一致。
5.EHEC除其代表菌株O157:H7外，還包括O157:NM、O26:H11、O111:H8、O125:NM、O121:H19、O45:H2、O4:NM、O145:NM、O5:NM、O91:H21、O103:H2、O113:H2等血清型的部分菌株。血清學(xué)鑒定包括O抗原和H抗原的鑒定。前者可使用玻片凝集試驗(yàn)或膠乳凝集試驗(yàn)；后者則應(yīng)先進(jìn)行動(dòng)力試驗(yàn)，動(dòng)力活潑者再進(jìn)行玻片和試管凝集試驗(yàn)。
四、致病性：
1、 致病因素：
E.coli O157:H7的另一個(gè)顯著特征是可產(chǎn)生大量的Vero**（VT），也稱作類志賀氏**（SLT），是EHEC的主要致病因子。Vero**按**原性等方面的不同可分為VT1和VT2。該**有一個(gè)A亞單位和5~6個(gè)B亞單位組成。B亞單位與宿主腸壁細(xì)胞糖脂受體結(jié)合，具有**活性的A亞單位進(jìn)入細(xì)胞，改變60s核糖體的組分，干擾蛋白質(zhì)的合成。編碼VT的基因位于噬菌體上，可缺失而不產(chǎn)生VT。
2、所致**：
(1) 輕度腹瀉
(2) 出血性結(jié)腸炎(HC)
(3) 溶血性尿毒綜合癥(HUS)
(4) 血栓性血小板減少性紫癜(TTP)
E.coli O157:H7的感染劑量極低。伏期為3-10天，病程2-9天。通常是突然發(fā)生劇烈**和水樣腹瀉，數(shù)天后出現(xiàn)出血性腹瀉，可發(fā)熱或不發(fā)熱。部分患者可發(fā)展為HUS、TTP等， 嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡。
五、E.coli O157:H7的檢驗(yàn)
(一) 國標(biāo)法（常規(guī)法）
1、增菌培養(yǎng)
2、分離
3、鑒定
(二) 金標(biāo)試紙法
該方法是中華人民共和國衛(wèi)生部頻布的“關(guān)于國內(nèi)腸出血性大腸桿菌O157：H7感染性腹瀉應(yīng)急處理預(yù)案”中的指定方法。
將樣品經(jīng)過特殊的前增菌及增菌后，取120ul的增菌培養(yǎng)液放入試紙夾的樣品槽中，樣品由于毛細(xì)管作用移至反應(yīng)區(qū)，反應(yīng)區(qū)中含有特殊的抗體(E.coli O157:H7抗體)它與膠體金顆粒共軛偶聯(lián)。如果樣品中存在抗原，將同金標(biāo)抗體結(jié)合形成抗原-抗體復(fù)合物，沿著硝酸纖維素膜向前移動(dòng)至含有固定的抗E.coli O157:H7抗體區(qū)域(T區(qū))，金標(biāo)**的復(fù)合物與該區(qū)域的抗抗體發(fā)生特異性結(jié)合形成一條可見的線。其它的樣品繼續(xù)移動(dòng)到膜的未端，*終進(jìn)入廢物池被遺棄。
反應(yīng)區(qū)也含有金標(biāo)結(jié)合的一種**抗原(顏色指示劑)，不管樣品中有沒有E.coli O157:H7抗原，它都被樣品洗脫。金標(biāo)控制指示劑通過膜移動(dòng)到陰性控制區(qū)與**抗體結(jié)合形成一條可見的線。無論樣品中有沒有E.coli O157:H7抗原，控制線都將在控制區(qū)(C區(qū))形成，來確保試驗(yàn)正常進(jìn)行。
增菌液滴入8-10分鐘后，觀察試紙C區(qū)和T區(qū)有無明顯的線。在C和T區(qū)都有可見的線，則結(jié)果為陽性。C區(qū)有線、T區(qū)無線，則結(jié)果為陰性。如C區(qū)無線，無論T區(qū)有沒有線，則實(shí)驗(yàn)無效。